Набор реагентов для иммуноферментного определения антител к тиреоидной пероксидазе

в сыворотке крови (ИммуноФА-Ат-ТПО)

Номер по каталогу ИФ-01-09

ТУ 9398-018-11361534-2007

Регистрационное удостоверение № ФСР 2007/00044

Набор ИммуноФА-Ат-ТПО предназначен для количественного определения аутоантител к тиреоидной пероксидазе (Ат к ТПО) в сыворотке крови человека методом иммуноферментного анализа на стрипованных полистироловых планшетах.

Ат к ТПО - антитела к пероксидазе клеток щитовидной железы, участвующей в синтезе тиреоидных гормонов. Эти антитела являются показателем агрессии иммунной системы по отношению к собственному организму. Тиреоидная пероксидаза обеспечивает образование активной формы йода, которая способна включаться в процесс модификации тиреоглобулина. Антитела к этому ферменту блокируют его активность, вследствие чего снижается секреция тиреоидных гормонов (Т₃,Т₄). Антитела к тиреопероксидазе - наиболее чувствительный тест для обнаружения аутоиммунного заболевания щитовидной железы. Обычно их появление является первым сдвигом, который наблюдается в ходе развивающегося гипотиреоза вследствие тиреоидита Хашимото. При использовании достаточно чувствительных методов Ат к ТПО обнаруживаются у 95% людей с тиреоидитом Хашимото и примерно у 85% пациентов с болезнью Грейвса. Обнаружение Ат к ТПО во время беременности говорит о риске развития у матери послеродового тиреоидита и возможном влиянии на развитие ребенка. Таким образом количественное определение уровня Ат к ТПО в крови человека необходимо для диагностики нарушений функции щитовидной железы при аутоиммунных заболеваниях (болезнь Грейвса, аутоиммунные тиреоидиты, диффузный токсический зоб), а также для контроля за течением заболевания и ходом его лечения.

Принцип метода – непрямой двухстадийный ИФА

S

P

P

Иммобилизо-ванный антиген

Анализируемый образец

Иммобили-зованные иммуноком-плексы

Конъюгат вторичных антител с пероксидазой

Иммобилизованные иммунокомплексы с мечеными антителами

Субстратная реакция

Схема проведения анализа

1. Внесение в лунки планшета по 0,05 мл калибровочных проб, контрольной сыворотки и разбавленных в 101 раз исследуемых сывороток крови, по 0,1 мл раствора для разведения и инкубация (45 мин, +37^оС).

2.Промывка лунок планшета.

3.Внесение в лунки планшета по 0,1 мл раствора конъюгата и инкубация (30 мин, +37^оС).

4. Промывка лунок планшета.

5. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл субстратного раствора и инкубация (10-15 мин, +37^оС).

6. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл стоп-реагента.

7. Измерение оптической плотности (l=450 нм), интерпретация результатов.

Основные ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

Чувствительность теста: не более 10 МЕ/мл.

Диапазон определяемых концентраций: 10 – 1000 МЕ/мл.

Длина волны измерения: 450 нм.

Субстрат: 3,3`,5,5`-тетраметилбензидин (ТМБ).

Условия инкубации (время, t^оС) :

- 1-ая инкубация 45 мин при +37^оС;

- 2-ая инкубация 30 мин при +37^оС;

- инкубация с ТМБ 10-15 мин при +37^оС.

Время проведения анализа: 2 часа.

Объем пробы: 50 мкл.

Количество анализируемой сыворотки: 10 мкл (для анализа сыворотка разводится в 101 раз и анализируется 50 мкл разведенной сыворотки).

Значение Ат-ТПО в норме: не более 30 МЕ/мл.

Количество анализов: набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 исследуемых образцах сывороток, 6 калибровочных проб и 1 пробы контрольной сыворотки, всего 96 определений.

Планшеты: стрипованные, разделяющиеся на отдельные лунки.

Срок годности набора: 12 месяцев.

Все реагенты набора представлены в жидком виде.

Калибровочные пробы аттестованы по международному стандарту ВОЗ.